井の頭自然文化園は、東京都武蔵野市（分園は三鷹市）にある都立の動物園。
井の頭公園の一角にある。開園は1942年（昭和17年）。
東京都建設局が所管していたが、指定管理者制度の導入に伴って、恩賜上野動物園、多摩動物公園、葛西臨海水族園とともに、2006年4月1日からは財団法人東京動物園協会に運営が引き継がれた。
武蔵野市御殿山にある本園と、三鷹市井の頭にある分園に分かれている。本園ではおもに哺乳類と鳥類が飼育され、井の頭池に囲まれた分園では水鳥が飼育されている。また、本園には「熱帯鳥温室」、分園には魚類や両生類を飼育する「水生物館」がある。
また、本園の一角には小さな遊園地（素朴なメリーゴーラウンドやコーヒーカップ・豆電車など）が設置されており、幼児向けの楽しい遊園地として親しまれている。
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